tRNAscanSE怎么安装使用

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tRNA  的预测可以使用  tRNAscanSE  ,该软件能够以每  15M  碱基假阳性低于  1  的灵敏度识别超过  99%  的  tRNA  基因,是目前预测  tRNA  最有力的工具。  tRNAscanSE  能在基因组水平上进行  tRNA  扫描,该软件利用  perl  整合了  tRNAscan  、  EufindRNA  和  Cove  这  3  个独立的  tRNA  检测软件,在运行时首先调用  tRNAscan  和  EufindRNA  鉴定基因组序列中的  tRNA  区域,然后调用  Cove  进行验证。

安装方法如下所示:

mkdir tRNAscantar -zxvf trnascan-se-2.0.5.tar.gzcd tRNAscan-SE-2.0./configure --prefix=(path)/tRNAscan #括号中省略了绝对路径makemake installecho 'export PATH=$PATH:(path)/tRNAscan/bin' >> ~/.bashrcsource ~/.bashrc
该工具依赖  Infernal  ,接下来还要安装  Infernal 1.1.2  ,如下所示:
wget -c http://eddylab.org/software/infernal/infernal-1.1.2.tar.gzmkdir infernaltar -zxvf infernal-1.1.2.tar.gzcd infernal-1.1.2./configure --prefix=(path)/infernalmakemake installecho 'export PATH=$PATH:(path)/infernal/bin' >> ~/.bashrcsource ~/.bashrc
tRNAscanSE  的使用方法如下所示:
tRNAscan-SE -B -o tRNA.out -f rRNA.ss -m tRNA.stats genome.fasta-A  适合于古细菌;-B  适合于细菌;-G  适合于古细菌,细菌和真核生物的混合序列;-O  适合于线粒体和叶绿体。不设置以上选项,则默认适合于真核生物;-C  仅使用Cove 进行tRNA 分析。虽然从一定程度上提高了准确性,但是运行速度很慢;-o  结果文件名-f  tRNA的二级结构结果文件名-m  统计结果文件名。

对细菌基因组序列进行预测,如下所示:

tRNAscan-SE -B -o twk.tRNA.out -f twk.tRNA.ss -m twk.tRNA.stats new.scaffolds.fasta

结果文件中out文件为不同Scaffolds上预测的tRNA位置及种类信息:

tRNAscanSE怎么安装使用

stats文件为预测到的tRNA统计信息,包括预测到的tRNA数、总碱基数等,如下所示:

tRNAscanSE怎么安装使用

ss文件为tRNA二级结构信息,如下所示:

tRNAscanSE怎么安装使用

其中大于号或小于号表示互补配对区域,点号表示环形域或非互补配对区域。可以根据out文件与基因组序列提取出tRNA的序列文件与gff文件,如下所示:

perl 10_tRNAscan_parser.pl twk.tRNA.out new.scaffolds.fasta TWK

结果如下所示:

tRNAscanSE怎么安装使用

序列名称后面为该  tRNA  所携带的氨基酸以及反密码子。

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